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如何算酶用量? 碱性蛋白酶活力计算

2020-12-15知识19

酶活力的常用测定方法?

如何算酶用量? 碱性蛋白酶活力计算

胰蛋白酶比活力的测定 1.胰蛋白酶是一种水解酶,它将酪蛋白水解成酪氨 酸等物质。2.所生成的酪氨酸能与酚试剂反应成蓝色物质.酚 试剂又名Folin试剂,是磷钨酸和磷钼酸的混合物,它在碱性条件下。

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如何算酶用量? 酶活单位是目标酶在反应体系中作用的活力大小的一个衡量指标

如何算酶用量? 碱性蛋白酶活力计算

测定蛋白酶活力实验 最低0.27元开通文库会员,查看完整内容>;原发布者:临泽潇洒哥测定蛋白酶活力实2113验一、实验5261目的1.加深了解酶活力的概念。41022.学习掌握测定蛋白酶活1653力的方法。二、实验原理酶活力指酶催化某一特定反应的能力。其大小可用在一定条件下酶催化反应进行一定时间后,反应体系中底物的减少量或产物的生成量来表示。酶活力单位是表示酶活力大小的重要指标。本实验规定酶活力单位(U)为一定条件下每分钟分解1μg酪氨酸所需的酶量。实验选用枯草杆菌蛋白酶水解酪蛋白产生酪氨酸的反应体系。产物酪氨酸在碱性条件下与Folin-酚试剂反应生成蓝色化合物,该蓝色化合物在680nm处有最大光吸收,其吸光值与酪氨酸含量呈正比。因此通过测定一定条件下产物酪氨酸的含量变化,可计算出蛋白酶的活力。三、仪器和试剂仪器:恒温水浴锅、分光光度计、试管及试管架、干燥滤纸、玻璃漏斗。原料枯草杆菌蛋白酶:称取1g枯草杆菌蛋白酶粉,用少量0.02mol/L,pH7.5磷酸缓冲液溶解并定容至100mL,震荡15分钟,使充分溶解,干纱布过滤,取滤液冰箱备用。使用时视酶活力高低用缓冲液适当稀释。试剂1.Folin-酚试剂:在2L磨口回流瓶中加入钨酸钠(Na2WoO4.2H2O)100g,钼酸钠(Na2WoO4.2H2O)25g,蒸馏水。

胃蛋白酶合剂的活力单位理论值是多少 不同公司的酶含量不同,稀释剂也不同,如可用乳糖、葡萄糖或蔗糖稀释制得。有的:每1g中含蛋白酶活bai力不少于120单位或1200单位。Sigma公司指出胃蛋白酶pepsin(1:10000)5g/25g产品的比活力du是800-2500u/mg。ICN公司的胃蛋白酶pepsin(1:3000,指1g:3000单位)是3000-3500U/mg。酶活力:催化一定化zhi学反应的能力。测定酶活力,即测定酶促反应的速度。酶活力单位u:指在一定条件下单位时间内底物的减少或产物的增加。一个活性单位:25度时,dao在最适底物浓度,最适缓冲液的离子强度,最适pH时,每分钟催化1umol/L底物的酶量。IU两者转化:IU=1umol/L*min举例说明:某酶制剂2ml内含脂肪10mg,糖20mg,蛋白质内25mg,其酶活力与市售酶商品(每克含2000酶活力单位)10mg相当,问酶制剂的比活力是多少?比活力=总活容力/mg蛋白市售商品比活力为2000/1000 mg=2U/mg商品酶总活力=10mg*2U/mg=20U其比活力:20U/25 mg=0.8U/mg相反,已知比活力,来求酶含量,即为酶制剂的纯度。

求助:蛋白酶酶活的测定方法 酶活测定方法 还原法酶与底物在特定的条件下反应,酶可以促使底物释放出还原性的基团。在此反应体系中添加化学试剂,酶促反应的产物可与该化学试剂发生反应,生成有色物质。通过在特定的波2113长下 比色,即可求 出还原产物的含量,从而计算出酶活力的大小。色原底物法通过底物与特定的可溶性生色基团物质结合,合成人工底物。该底物与酶发生反应后,生色基团可被释放出来,用分光光度法即可测定颜色的深浅,在与已知标准酶所做的曲线比较后,即可求出待测酶的活5261力。粘度法该法常用于测定纤维素酶、木聚糖酶和β-葡聚糖酶 的活力。木聚糖和β-葡聚糖溶液通常情况下可形成极高的粘度,当酶作用于粘性底物时木聚糖和β-葡聚糖会被切割成较小的分子使其粘度大 为降低。基 于Poiseuille定律我们知道,只要测定一定条件下溶剂和样品溶液的运动粘度,便可计算特性粘数,并以此来判断酶的活力。高压液相色谱法酶与其底物在特定的条件下充分反应后,在一定的色谱条件下从反应体系中提取溶液进行色谱分析,认真记录保留时间和色谱图,测量各个样的峰高和半峰高,计算出酶促反应生成物的含量,从而换算出酶活力的数值。免疫学方法常用 于酶活性分析的4102免疫学方法包括:免疫电泳法、免疫。

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