四甲基联苯胺的简介
，3'5，5'-四甲基联苯胺比色法 方法提要 在pH>；2的酸性溶液e68a84e8a2ade79fa5e9819331333433616235中，余氯与3，3'，5，5'-四甲基联苯胺(以下简称四甲基联苯胺)反应，生成黄色的醌式化合物，用目视比色法。
，3'5，5'-四甲基联苯胺比色法 方法提要在pH>；2的酸性溶液中，余氯与3，3'，5，5'-四甲基联苯胺(以下简称四甲基联苯胺)反应，生成黄色的醌式化合物，用目视比色法定量。本法检测下限为0.005mg/L余氯。含量>；0.12mg/L铁和0.05mg/L亚硝酸盐对本法有干扰。试剂氯化钾-盐酸缓冲溶液(pH2.2)称取3.7g经100～110℃干燥至恒量的KCl，用纯水溶解，再加0.56mLHCl，并用纯水稀释至1000mL。3，3'，5，5'-四甲基联苯胺溶液(0.3g/L)称取0.03g3，3'，5，5'-四甲基联苯胺(C16H2ON2)，用100mL0.1mol/LHCl分批加入并搅拌使试剂溶解(必要时可加温助溶)，混匀，此溶液应无色透明、贮存于棕色瓶中，在常温下可保存6个月。重铬酸钾-铬酸钾溶液称取0.1550g经120℃干燥至恒量的重铬酸钾(K2Cr2O7)及0.4650g经120℃干燥至恒量的铬酸钾(K2CrO4)，溶于KCl-HCl缓冲溶液中，稀释至1000mL。此溶液生成的颜色相当于1mg/L余氯与四甲基联苯胺生成的颜色。EDTA二钠盐溶液(20g/L)。余氯标准系列(0.005～1.00mg/L)按表81.4所列用量分别吸取K2Cr2O7-K2CrO4溶液，注入50mL具塞比色管中，用KCl-HCl缓冲溶液稀释至50mL，在冷暗处保存可使用6个月。表81.4 0.005～1.0mg/L余氯标准色列的配制注：水样余氯大于1mg/L时，可将重铬酸钾-铬酸钾溶液。
酶联免疫诊断试剂盒的底物A和B分别什么作用？ 酶联免疫诊断试剂盒（上海科华的试剂盒）的底物A就是显色剂A（含过氧化氢）为供氢体（DH2），底物B就是显色剂B（含TMB），用于显色。另外，常用的底物还有：1）AP的底物，常用的为对-硝基苯磷酸脂（PNP），其反应物为黄色的对硝基酚，测读波长为405nm2）GOD的底物，为葡萄糖，供氢体为对硝基蓝四氮唑，反应产物为不溶性的蓝色沉淀 什么是TMB？TMB即四甲基联苯胺（3，3’，5，5’-Tetramethylbenzidine）是一种脂溶性较强的基团，因此容易进入细胞与细胞器中的HRP反应，且由于这种高度的脂溶性，使其易形成多聚体，在HRP活性部位产生粗大的、深兰色沉淀物，这使得TMB成为组化实验中的一种很好的发色团。同时反应产物的沉淀，使得HRP的活性部位更加暴露，利于酶氧化反应进行。TMB的反应产物为深蓝色，利于光镜观察，且反应产物越聚越大，常超出单e79fa5e98193e4b893e5b19e31333332623937个细胞器的范围（而DAB则被限制在其内），故TMB反应的检测阈较低。由于上述优点，目前TMB常用于光镜及超微结构水平的HRP及HRP-WGA神经投射的研究。需要注意的是：TMB显色液中的A液和B液应在2h内新鲜配制。另外，TMB是一种较强的皮肤刺激剂，并有致癌的潜在可能，故使用时应带手套及在。
请教ELISA 显色底物DAB，OPD，ABTS，TMBS有什么区别 HRP的催化反应需要底物过氧化氢(H2O2)和供氢体(DH2)。供氢体多为无色的还原型染料，通过反应可生成有色的氧化型染料(D)。酶促反应的过程如下：HRPDH2＋H2O2—→D＋2H2O供氢体的种类很多，形成的产物特点不一。DAB(3.3－二氨基联苯胺)的反应产物为不溶性沉淀物，并有电子密度，故适宜于做免疫酶染色或电镜观察。5AS(5-氨基水杨酸)早期曾用于ELISA，但其溶解度不够大，且空白孔不易控制到无色，现已很少应用。OT(邻联甲苯胺)的特点是能产生鲜艳的蓝绿色产物且灵敏度较高，但反应中受温度影响较大，而且由于产物不稳定，需要在短时间内进行测定。目前用得较广泛和较满意的供氢体是：OPD(邻苯二胺)和TMB(四甲基联苯胺)。前者形成的产物为深桔黄色或棕色，后者产物为蓝绿色，二者的可溶性均好，在避光处颜色稳定，空白可近于无色，灵敏度上据报道后者比前者可高4倍以上。另外，还有一种供氢体称ABTS[2，2'-边氮基-双(3-乙基苯并噻吡咯啉-6磺酸)]，其反应产物呈蓝绿色，且灵敏度和稳定性均好。尤其是在致癌的潜在可能性方面，ABTS与TMB皆是值得被优选的供氢体。
过氧化物酶染色四甲基联苯胺法的原理是什么？ 粒细胞和部分单核细胞的溶酶体颗粒中含有过氧化物酶（POX），POX能分解H2O2而释放出新生氧，使四甲基联苯胺氧化成联苯胺蓝，后者与亚硝基铁氰化钠结合，再进一步氧化形成。
免疫印迹法区带显色常用的底物是（） A.邻苯二胺 B.四甲基联苯胺 C.ABTS D 参考答案：E
TMB是什么化学物质 四甲基联苯胺是一种化学物质，化学式是C16H20N2。中文名 四甲基联苯胺 英文名 Tetramethylbenzidine 别称 3，3'，5，5'-四甲基联苯胺 化学式 C16H20N2 简介 英文名称：。
western blot和elisa用的二抗相同 为什么显色液不同 其实都是HRP催化底物反应，与固相载体无关，他们在反应的整个过程都起到了相同的作用－供氢体HRP的催化反应需要底物过氧化氢(H2O2)和供氢体(DH2).供氢体多为无色的还原型染料，通过反应可生成有色的氧化型染料(D).酶促反应的过程如下：HRPDH2＋H2O2─→D＋2H2O目前用得较广泛和较满意的供氢体是：OPD(邻苯二胺)和TMB(四甲基联苯胺).DAB(3.3－二氨基联苯胺)的反应产物为不溶性沉淀物，并有电子密度，故适宜于做免疫酶染色或电镜观察.5AS(5-氨基水杨酸)早期曾用于ELISA，但其溶解度不够大，且空白孔不易控制到无色，现已很少应用.OT(邻联甲苯胺)的特点是能产生鲜艳的蓝绿色产物且灵敏度较高，但反应中受温度影响较大，而且由于产物不稳定，需要在短时间内进行测定.目前用得较广泛和较满意的供氢体是：OPD(邻苯二胺)和TMB(四甲基联苯胺).前者形成的产物为深桔黄色或棕色，后者产物为蓝绿色，二者的可溶性均好，在避光处颜色稳定，空白可近于无色，灵敏度上据报道后者比前者可高4倍以上.另外，还有一种供氢体称ABTS[2，2'-边氮基-双(3-乙基苯并噻吡咯啉-6磺酸)]，其反应产物呈蓝绿色，且灵敏度和稳定性均好.尤其是在致癌的潜在可能性方面，ABTS与TMB皆是值得被优选的供氢体.
四甲基联苯胺的应用 TMB的反应产物为深蓝色，利于光镜观察，且反应产物越聚越大，常超出单个细胞器的范围（而DAB则被限制在其内），故TMB反应的检测阈较低。由于上述优点，目前TMB常用于光镜及超微结构水平的HRP及HRP-WGA神经投射的研究。需要注意的是：TMB显色液中的A液和B液应在2h内新鲜配制。另外，TMB是一种较强的皮肤刺激剂，并有致癌的潜在可能，故使用时应带手套及在通风条件下操作。TMB经HRP作用后共产物显蓝色，目视对比鲜明。TMB性质较稳定，可配成溶液试剂，只需与H2O2溶液混和即成应用液，可直接作底物使用。另外，TMB又有无致癌性等优点，因此在ELISA中应用日趋广泛。酶反应用HCL或H2SO4终止后，TMB产物由蓝色呈黄色，可在比色计中定量，最适吸收波长为450nm。ABTS虽不如OPD和TMB敏感，但空白值极低，也为一些试剂盒所采用
