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用紫外分光光度计测得dna浓度单位 如何用紫外分光光度计测DNA浓度

2020-10-16知识6

用分光光度计测dna浓度的数值代表什么意义 首先,分光光2113度计测量的样品必须是5261均一的,摇匀后再测量结果会准确些.它是利4102用分光光度法对物质进行定量定1653性分析的仪器.核酸的定量是分光光度计使用频率最高的功能.可以定量溶于缓冲液的寡核苷酸,单链、双链DNA,以及RNA.核酸的最高吸收峰的吸收波长260 nm.每种核酸的分子构成不一,因此其换算系数不同.定量不同类型的核酸,事先要选择对应的系数.如:1OD 的吸光值分别相当于50μg/ml的dsDNA,37μg/ml的ssDNA,40μg/ml的RNA,30μg/ml的Olig.测试后的吸光值经过上述系数的换算,从而得出相应的样品浓度.测试前,选择正确的程序,输入原液和稀释液的体积,尔后测试空白液和样品液.然而,实验并非一帆风顺.读数不稳定可能是实验者最头痛的问题.灵敏度越高的仪器,表现出的吸光值漂移越大.事实上,分光光度计的设计原理和工作原理,允许吸光值在一定范围内变化,即仪器有一定的准确度和精确度.如Eppendorf Biophotometer的准确度≤1.0%(1A).这样多次测试的结果在均值1.0%左右之间变动,都是正常的.另外,还需考虑核酸本身物化性质和溶解核酸的缓冲液的pH值,离子浓度等:在测试时,离子浓度太高,也会导致读数漂移,因此建议使用pH值一定、离子浓度较低的缓冲液,如TE,可。

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利用紫外分光光度计测得DNA或RNA浓度的结果比实际浓度一般 是偏高还是偏低?为什么?

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用分光光度计测DNA、RNA的浓度 最低0.27元开通文库会员,查看完整内容>;原发布者:ryp923用分光光度计测定质粒DNA的浓度一、目的熟练掌握分光光度法检测DNA纯度和浓度的方法。二、原理DNA或RNA链上碱基的苯环结构在紫光区具有较强吸收,其吸收峰在260nm处。波长为260nm时,DNA或RNA的光密度OD260不仅与总含量有关,也随构型而有差异。对标准样品来说,浓度为1μg/ml时,DNA钠盐的OD260=0.02当OD260=1时,dsDNA浓度约为50μg/mlssDNA浓度约为37μg/mlRNA浓度约为40μg/ml寡核苷酸浓度约为30μg/ml(youyu底物不同有差异)当DNA样品中含有蛋白质、酚或其他小分子污染物时,会影响DNA吸光度的准确测定。一般情况下同时检测同一样品的OD260、OD280和OD230,计算其比值来衡量样品的纯度。经验值:纯DNA:OD260/OD280≈1.8(>1.9,表明有RNA污染;6,表明有蛋白质、酚等污染)纯RNA:1.7(时表明有蛋白质或酚污染;2.0时表明可能有异硫氰酸残存)若样品不纯,则比值发生变化,此时无法用分光光度法对核酸进行定量,可使用方案二的方法或其他方法进行估算。三、材料、试剂及器具1、材料提取的PUC19样品、PUC19标准样品2、试剂灭菌重蒸水,TE缓冲液四、操作步骤1、UV-240紫外分光光度计开机预热10min.2、用重蒸水。

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如何用紫外分光光度计测DNA浓度 首先,分光光度计测量2113的样品必须5261是均一的,摇匀后再测量结果会准确些。4102它是利用分光1653光度法对物质进行定量定性分析的仪器。核酸的定量是分光光度计使用频率最高的功能。可以定量溶于缓冲液的寡核苷酸,单链、双链DNA,以及RNA。核酸的最高吸收峰的吸收波长260 nm。每种核酸的分子构成不一,因此其换算系数不同。定量不同类型的核酸,事先要选择对应的系数。如:1OD 的吸光值分别相当于50μg/ml的dsDNA,37μg/ml的ssDNA,40μg/ml的RNA,30μg/ml的Olig。测试后的吸光值经过上述系数的换算,从而得出相应的样品浓度。测试前,选择正确的程序,输入原液和稀释液的体积,尔后测试空白液和样品液。然而,实验并非一帆风顺。读数不稳定可能是实验者最头痛的问题。灵敏度越高的仪器,表现出的吸光值漂移越大。事实上,分光光度计的设计原理和工作原理,允许吸光值在一定范围内变化,即仪器有一定的准确度和精确度。如Eppendorf Biophotometer的准确度≤1.0%(1A)。这样多次测试的结果在均值1.0%左右之间变动,都是正常的。另外,还需考虑核酸本身物化性质和溶解核酸的缓冲液的pH值,离子浓度等:在测试时,离子浓度太高,也会导致读数漂移,因此建议使用。

利用紫外分光光度计测定浓度的适用范围 科研机构:国家质检机构对产品的质量检验、制造企业产成品的质量控制、进出口商品的检验检疫、科研院所。教学研究:可应用于配合物组成测定、动力学研究、酸碱离解常数测定、光度滴定。环境监测:可按国家标准完成对水质,大气、降雨及土壤等的监测,测定其中各类污染物的含量。生命科学:可对生命领域的微量样品进行测试,并提供DNA/蛋白质检测器,能够快速的测量DNA/蛋白质的浓度。同时还可以设置不同分析方法,从而满足不同的需要。制造业:可应用于工业生产的过程控制和有机合成中间体的分析、食品中的添加剂、防腐剂、香料分析,以及食品中的脂肪、酶、糖类、矿物质、维生素等营养成分的含量测定,化妆品等。石油化工:可应用于石化生产中的过程中控、成品检验。卫生防疫:医药卫生、临床分析、疾控分析、生命领域的微量样品测试、人体生化指标分析、代谢产物分析、药品分析。地质勘察:可应用于矿产中金属元素和无机盐的测定、海洋地质勘察、水文站等。水质分析:可应用于自来水厂、污水处理厂。农、林业:可应用于农业、林业的各具体行业,例如农药残留检测、作物成分检测、化肥检测、土壤成分检测、植物保护、植物检疫等。牧、渔业:可应用于兽药检测、饲料。

如何用紫外分光光度计测DNA浓度 首先,分光光度计测量的样品必须是均一的,摇匀后再测量结果会准确些。它是利用分光光度法对物质进行定量定性分析的仪器。核酸的定量是分光光度计使用频率最高的功能。可以定量溶于缓冲液的寡核苷酸,单链、双链DNA,以及RNA。核酸的最高吸收峰的吸收波长260 nm。每种核酸的分子构成不一,因此其换算系数不同。定量不同类型的核酸,事先要选择对应的系数。如:1OD 的吸光值分别相当于50μg/ml的dsDNA,37μg/ml的ssDNA,40μg/ml的RNA,30μg/ml的Olig。测试后的吸光值经过上述系数的换算,从而得出相应的样品浓度。测试前,选择正确的程序,输入原液和稀释液的体积,尔后测试空白液和样品液。然而,实验并非一帆风顺。读数不稳定可能是实验者最头痛的问题。灵敏度越高的仪器,表现出的吸光值漂移越大。事实上,分光光度计的设计原理和工作原理,允许吸光值在一定范围内变化,即仪器有一定的准确度和精确度。如Eppendorf Biophotometer的准确度≤1.0%(1A)。这样多次测试的结果在均值1.0%左右之间变动,都是正常的。另外,还需考虑核酸本身物化性质和溶解核酸的缓冲液的pH值,离子浓度等:在测试时,离子浓度太高,也会导致读数漂移,因此建议使用pH值一定、离子浓度较。

如何用紫外分光光度计测DNA浓度 首先,分光光度计测量的样品必须是均一的,摇匀后再测量结果会准确些.它是利用分光光度法对物质进行定量定性分析的仪器.核酸的定量是分光光度计使用频率最高的功能.可以定量溶于缓冲液的寡核苷酸,单链、双链DNA,以及RN.

紫外可见分光光度计能测哪些指标 每种物质就有2113其特有的、固定的吸收光谱曲线,可5261根据4102吸收光谱上的某些特征波长处的吸1653光度的高低判别或测定该物质的含量,这就是分光光度定性和定量分析的基础。因此可以适用这个原理、并在紫外可见光分光光度计光谱检测范围的物质都可以使用紫外可见光分光光度计。常见的有以下几种:药物分析:《国家药典》可用紫外可见光分光光度法检测的药品,适用于药品检验、药物分析、制药等行业。生命科学:DNA、蛋白质的浓度。农牧渔:农药残留检测、作物成分检测、兽药检测、饲料检测、化肥检测、土壤成分检测、水产养殖检测等。地质勘探:矿石中金属元素和无机盐的测定。食品安全:添加剂、防腐剂、香料、脂肪、酶、糖类、香料、矿物质、维生素等的含量。环境监测:水质、大气、降雨及土壤等的监测,测定其中各类污染物的含量。

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