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紫外可见分光光度法,用吸收系数法定量,公式是什么? 紫外分光光度计的应用定量分析

2020-10-18知识17

紫外可见分光光度法,用吸收系数法定量,公式是什么? A=ECL C=A/ELA为吸收度;T为透光率;E为吸收系数,采用的表示方法是(E1%1cm),其物理意义为当溶液浓度为1%(g/ml),液层厚度为1cm时的吸收度数值;C为100ml溶液中所含被测物质的重量(按干燥品或无水物计算),g;L为液层厚度,cm。在给定波长,溶剂和温度等条件下,吸光物质在单位浓度,单位液层厚度时的吸收度称为吸收系数。根据比尔定律,吸光度A与吸光物质的浓度c和吸收池光程长b的乘积成正比。当c的单位为g/L,b的单位为cm时,则A=abc,比例系数a称为吸收系数,单位为L/g.cm-1;当c的单位为mol/L,b的单位为cm时,则A=εbc,比例系数ε称为摩尔吸收系数,单位为L/mol.cm-1,数值上ε等于a与吸光物质的摩尔质量的乘积。它的物理意义是:当吸光物质的浓度为1mol/L,吸收池厚为1cm,以一定波长的光通过时,所引起的吸光度值A。ε值取决于入射光的波长和吸光物质的吸光特性,亦受溶剂和温度的影响。显然,显色反应产物的ε值愈大,基于该显色反应的光度测定法的灵敏度就愈高。扩展资料:紫外分光光度法是根据物质分子对波长为200nm-400nm这一范围的电磁波的吸收特性所建立起来的一种定性、定量和结构分析方法。操作简单、准确度高、重视性好。波长长(频率小。

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紫外可见分光光度计的用途是什么 用来测量待测物质对可见光(400~760nm)的吸光度并进行定量分析的仪器,称为可见分光光度计。截止阀可在600nm测定细菌细胞密度。(2)紫外可见分光光度计紫外可见光谱仪用来测量待测物质对可见光或紫外光(200~760nm)的吸光度并进行定量分析的仪器。可以测定核酸和蛋白的浓度,涡街流量计也可以测定细菌细胞密度。紫外分光光度计又可分为单光束,假双光束,双光束。它们的用途又有区别。单光束:适于在给定波长处测量吸光度或透光度,一般不能作全波段光谱扫描,要求光源和检测器具有很高的稳定性。双光束:自动记录,快速全波段扫描。可消除光源不稳定、检测器灵敏度变化等因素的影响,特别适合于结构分析。仪器复杂,价格较高。假双光束也就是比例双光束,它的原理是由同一单色器发出的光被分成两束,一束直接到达检测器,另一束通过样品后到达另一个检测器。电热带这种仪器的优点是可以监测光源变化带来的误差,但是并不能消除参比造成的影响。(3)红外分光光度计一般的红外光谱是指大于760nm的红外光谱,这是研究有机化合物最常用的光谱区域,能分析各种状态(气、液、固)的试样。红外光谱法的特点是:快速、样品量少(几微克-几毫克),特征性强(各种物质有其特定的。

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分光光度计在医学领域主要应用于那些方面 分光光度计在医学领域主要应用于:核酸的定量、蛋白质的直接定量(UV法)、比色法蛋白质定量。1、核酸的定量核酸的定量是分光光度计使用频率最高的功能。可以定量溶于缓冲液的寡核苷酸,单链、双链DNA,以及RNA。核酸的最高吸收峰的吸收波长260 nm。每种核酸的分子构成不一,因此其换算系数不同。定量不同类型的核酸,事先要选择对应的系数。如2、蛋白质的直接定量(UV法)这种方法是在280nm波长,直接测试蛋白。选择Warburg 公式,光度计可以直接显示出样品的浓度,或者是选择相应的换算方法,将吸光值转换为样品浓度。蛋白质测定过程非常简单,先测试空白液,然后直接测试蛋白质。3、比色法蛋白质定量蛋白质通常是多种蛋白质的混合物,比色法测定的基础是蛋白质构成成分:氨基酸(如酪氨酸,丝氨酸)与外加的显色基团或者染料反应,产生有色物质。有色物质的浓度与蛋白质反应的氨基酸数目直接相关,从而反应蛋白质浓度。向左转|向右转扩展资料分光光度计测量范围一般包括波长范围为380~780 nm的可见光区和波长范围为200~380 nm的紫外光区。不同的光源都有其特有的发射光谱,因此可采用不同的发光体作为仪器的光源。钨灯的发射光谱:钨灯光源所发出的380~780。

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可见分光光度计与紫外分光光度计有什么区别?以及各种部件的区别?

分光光度法和比色法有何异同

紫外分光光度法与可见分光光度法有何异同 1、测量的范围不同:(1)紫外分光光度计量程为200nm~600nm间,其中包括部分可见光。(2)可见分光光度计量程为320nm-1100nm,能满足不同物质的测试。。

紫外分光光度法和荧光分析法的区别和各自的优缺点? 1、原理不同:(1)紫外分光光度计,就是根据物质的吸收光谱研究物质的成分、结构和物质间相互作用的有效手段。(2)荧光分光光度法是根据物质的荧光谱线位置及其强度进行。

紫外可见分光光度法特点和适用范围 一、紫外可见分光光2113度法的特点1、与其它5261光谱分析方法相比,紫外4102可见分光光度法事物仪器设备和操作都1653比较简单,费用少,分析速度快。2、紫外可见分光光度法的灵敏度高。3、紫外可见分光光度法的选择性好。4、紫外可见分光光度法的精密度和准确度较高。二、紫外可见分光光度法的适用范围紫外可见分光光度法可适用于定性定量分析、纯度分析、结构分析。特别在定量分析和纯度检查方面,在许多领域更是必备的分析方法,例如食品等行业中的产品质量控制。扩展资料紫外可见分光光度法的注意点:1、准备操作仪器前,需要先查看一下指针仪器在断电的情况下,表面指针是否指向零刻度。如若不是,理应先调零然后才能连接电源。2、在使用的过程中,操作员应该尽量避免对镜灯的触碰,放大器使用过后,一定需要把档位归置到零。3、在操作紫外可见分光光度计时,操作人员需要留意一下机器的干燥剂。4、紫外可见分光光度计在开机前将样品室内的干燥剂取出,仪器自检过程中禁止打开样品室盖。参考资料来源:-紫外-可见分光光度法

在紫外可见分光光度法的定量分析中误差来源有几个方面?如何避免? 紫外—可见分光光度分析法一、基本要求掌握:本章要求掌握分光光度法的特点、基本原理、测定方法及计算方法;分子吸收光谱与电子跃迁类型,物质对光的选择吸收与吸收光谱曲线,摩尔吸收系数与吸收系数,吸光度与透光度,偏离朗伯-比尔定律的原因;掌握显色反应条件及光度测量条件的选择;掌握紫外—可见分光光度计的主要部件,各部件的作用及仪器原理,主要类型及特点;掌握差示分光光度法的原理、特点.理物质分子结构与紫外吸收光谱的关系,吸收波长位移与分子结构变化的关系;紫外—可见分光光度定量分析影响结果准确度的各种因素.了了解紫外—可见分光光度法测定灵敏度和选择性的途径;双波长分光光度法等其它分光光度法定量测定的方法;紫外—可见分光光度法在有机化合物的结构解析方面的作用及在其他方面的应用.二、基本概念与重点内容A概述1.紫外—可见分光光度法的特点灵敏度与准确度较高;选择性较好;设备简单、操作简便.2.分光光度法的发展过程目视比色法 光电比色法 分光光度法3.分子的紫外—可见吸收光谱分子的紫外—可见吸收光谱是基于物质分子吸收紫外辐射或可见光,其外层电子跃迁而成,又称分子的电子跃迁光谱.紫外—可见分光光度法是基于物质分子的。

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