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紫外可见分光光度法误差来源 分光光度法的误差来源有哪些

2020-10-18知识11

分光光度计测量误差来源有哪些?

紫外可见分光光度法误差来源 分光光度法的误差来源有哪些

紫外可见分光光度法测核酸含量的误差来源是什么?如何排除 误差可能是由于蛋白质污染或者是其他试剂残留所引起的.A260/A280的比值,用于评估样品的纯度,因为蛋白的吸收峰是280nm.纯净的样品,比值大于1.8(DNA)或者2.0(RNA).如果比值低于1.8 或者2.0,表示存在蛋白质或者酚类物质的影响.A230表示样品中存在一些污染物,如碳水化合物,多肽,苯酚等,较纯净的核酸A260/A230的比值大于2.0.A320检测溶液的混浊度和其他干扰因子.纯样品,A320一般是0.

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分光光度法的误差来源有哪些? 1,人工误差液体有沉淀,液体不稳定,光解或是吸收空气中的组分反应,比色皿不干净或是有磨损,空白不准~2,仪器误差预热不够,光源不稳我大概能想起这些

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紫外分光光度法测定氯霉素含量实验中引起误差的原因是什么 标准溶液配制的不精2113确,标准样品取点少使5261得标准曲线有误差4102,比色皿的透光面不清洁,样品1653中出现的干扰性杂质等,样品的品行测定次数太少以及系统误差等。紫外-可见分光光度法:是根据物质分子对波长为200-760nm这一范围的电磁波的吸收特性所建立起来的一种定性、定量和结构分析方法。操作简单、准确度高、重现性好。波长长(频率小)的光线能量小,波长短(频率大)的光线能量大。分光光度测量是关于物质分子对不同波长和特定波长处的辐射吸收程度的测量。紫外-可见分光光度计由5个部件组成:①辐射源。必须具有稳定的、有足够输出功率的、能提供仪器使用波段的连续光谱,如钨灯、卤钨灯(波长范围350~2500纳米),氘灯或氢灯(180~460纳米),或可调谐染料激光光源等。②单色器[1]。它由入射、出射狭缝、透镜系统和色散元件(棱镜或光栅)组成,是用以产生高纯度单色光束的装置,其功能包括将光源产生的复合光分解为单色光和分出所需的单色光束。③试样容器,又称吸收池。供盛放试液进行吸光度测量之用,分为石英池和玻璃池两种,前者适用于紫外到可见区,后者只适用于可见区。容器的光程一般为0.5~10厘米。④检测器,又称光电转换器。常用的有。

紫外可见分光光度计怎么由吸光度计算含量? 根据朗2113伯比尔定律得出:当一束平行5261单色光通过一定液层厚度的有色溶4102液时,由于溶质吸收了1653光能,光的强度就会减弱。溶液浓度越大,液层越厚,入射光越强,光被吸收的就越多。如果用公式表示的话,就可以表示为表示为:A=E*C*L(A为吸光度,C为溶液浓度,L为液层厚度)。E是物质在一定波长下的特征常数,与对光吸收的灵敏度呈正相关。该公式适用于有色溶液和均匀非散射的吸光物质(如:固、液、气)。在进行含量测定的时候,我们往往选择被测物质的最大吸收波长来作为使用波长,以防止外界干扰。于是,我们可以根据公式可以计算测定管中物质的含量,过程如下:A1=E1*C1*L1 A2=E2*C2*L2A1/(E1*C1)=A2/(E2*C2)由于标准液和待测液中的物质相同,故E1=E2∴C2=(A2/A1)*C1因为标准液和待测液的体积相等,物质含量m=C*V*M(M为相对分子质量,V为体积)故m2=(A2/A1)*m1所以溶液中物质的含量m2。扩展资料:在分光光度分析中,比尔定律是一个有限的定律,其成立条件是待测物为均一的稀溶液、气体等,无溶质、溶剂及悬浊物引起的散射;入射光为单色平行光。导致偏离朗伯-比尔定律的原因很多,但基本上可分为物理和化学两个方面。物理方面主要是入射光的单色。

分光光度法的误差来源有哪些 分光光度法的误差来源:1)溶液偏离比尔定律引起的误差一方面是溶液中吸光物质不稳定,在测定过程中,被测物质逐渐发生离解、缔合,使被测物质的组成改变产生的误差;另一方面是单色光纯度差引起溶液对比尔定律的偏离,使标准曲线上部发生弯曲,产生误差。2)仪器误差由于仪器不够精密引起的误差,如光源不稳定、光电管灵敏性差、吸收池的厚度不均匀等都会引入误差。3)操作者主观因素引起的误差由于使用仪器不够熟练或操作不当;样品液与标准液的处理没有按相同的条件和步骤进行;读数不够准确等,都属于主观误差。

在紫外可见分光光度法的定量分析中误差来源有几个方面?如何避免? 紫外—可见分光光度分析法一、基本要求掌握:本章要求掌握分光光度法的特点、基本原理、测定方法及计算方法;分子吸收光谱与电子跃迁类型,物质对光的选择吸收与吸收光谱曲线,摩尔吸收系数与吸收系数,吸光度与透光度,偏离朗伯-比尔定律的原因;掌握显色反应条件及光度测量条件的选择;掌握紫外—可见分光光度计的主要部件,各部件的作用及仪器原理,主要类型及特点;掌握差示分光光度法的原理、特点.理物质分子结构与紫外吸收光谱的关系,吸收波长位移与分子结构变化的关系;紫外—可见分光光度定量分析影响结果准确度的各种因素.了了解紫外—可见分光光度法测定灵敏度和选择性的途径;双波长分光光度法等其它分光光度法定量测定的方法;紫外—可见分光光度法在有机化合物的结构解析方面的作用及在其他方面的应用.二、基本概念与重点内容A概述1.紫外—可见分光光度法的特点灵敏度与准确度较高;选择性较好;设备简单、操作简便.2.分光光度法的发展过程目视比色法 光电比色法 分光光度法3.分子的紫外—可见吸收光谱分子的紫外—可见吸收光谱是基于物质分子吸收紫外辐射或可见光,其外层电子跃迁而成,又称分子的电子跃迁光谱.紫外—可见分光光度法是基于物质分子的。

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