用紫外可见分光光度法测定苯甲酸 紫外-可见分光光度法测定苯2113甲酸5261离解常数pKa一、实验目的 1.掌握测4102定不同pH条件下的苯甲酸的吸光度并通过计1653算公式求算出它的离解常数的原理和方法。2.熟悉用紫外-可见分光光谱分析法在研究离子平衡中的应用。二、实验原理 如果一个化合物其紫外吸收光谱随其溶液的pH（即溶液中氢离子浓度）不同而变化，就可以利用紫外光谱测定其离解常数pKa，它的平衡式可表示为：Hin=H-+In-其中pH为：pH=Pka—log 或者：pKa=pH+log 若以pH对log 作图可以获得一条直线，当[In-]=[Hin]时其截距为离解常数pKa。绘制弱酸的紫外-可见光谱吸收曲线，在低、高两种pH状态时，若其溶液中含有指示剂，则可分别以In-和 Hin形式存在于溶液中，由两条吸收曲线就能方便的求出各自的λmax值，再配制成不同pH值的一系列指示剂溶液，于这两个λmax处测量它们的吸光度。可以通过实验测获它们在强酸、强碱、中性三类不同pH值介质中的稀溶液的吸光度，代入以下公式求出该化合物的离解常数pKa：=若以pH值为横坐标，吸光度为纵坐标作图，能获得两条S形曲线，该曲线中间所对应的pH值即为离解常数pKa。三、仪器和试剂 紫外-可见光谱仪（TU-1901，北京普析通用仪器有限责任公司生产），它的。
紫外分光光度法测定蛋白质含量实验报告 最低0.27元开通文库会员，查看完整内容>；原发布者：midanshen1紫外分光光度法测定蛋白质含量一、实验目的1.学习紫外光度法测定蛋白质含量的原理；2.掌握紫外分光光度法测蛋白质含量的实验技术。二、实验原理1.测蛋白质含量的方法主要有：①测参数法：折射率、相对密度、紫外吸收等；②基于化学反应：定氮法、双缩脲法、Folin―酚试剂法等。本实验采用紫外分光光度法。2.蛋白质中的酪氨酸和色氨酸残基的苯环中含有共轭双键，因此，蛋白质具有吸收紫外光的性质，其最大吸收峰位于280nm附近（不同蛋白质略有不同）。在最大吸收波长处，吸光度与蛋白质溶液的浓度服从朗伯―比尔定律。利用紫外吸收法测蛋白质含量的准确度较差，原因有二：①对于测定那些与标准蛋白质中酪氨酸和色氨酸含量差异较大的蛋白质，有一定误差，故该法适于测定与标准蛋白质氨基酸组成相似的蛋白质；②样品中含有的嘌呤、嘧啶等吸收紫外光的物质，会出现较大干扰。三、仪器与试剂TU―1901紫外可见分光光度计、标准蛋白质溶液3.00mg·mL-1、0.9%NaCl溶液、试样蛋白质溶液。10mL比色管、1cm石英比色皿、吸量管。四、实验步骤1.绘制吸收曲线用吸量管吸取2mL3.00mg·mL-1标准蛋白质溶液于10mL比色管中，用0.9%NaCl。
影响紫外分光光度法测定的因素有哪些 1.仪器是否工作正常（光源灯老化，电压不稳定，集成电路板、显示器有毛病，波长调节器有毛病等等）2.标准溶液浓度是否准确 3.所用方法是否合理（你选用的标准方法是否符合你要测定的对象—被测定浓度范围，干扰情况，赋存状态等等）4.所用试剂是否符合要求（纯度、干扰情况）5.所用量器（天平、容量瓶、移液管等）是否存在系统误差 6.配置显色过程是否误操作（加入试剂顺序、加入量等）7.显色时间、显色温度是否符合要求 8.样品槽是否洁净 9.测试吸光度范围是否在0.2-0.8之间 除此之外，数据处理也会带来误差。最好采用标准系列法，平行多次测定，计算机程序绘图，计算机计算每侧测定结果并求出平均值，按误差理论对数据进行处理，最后给出结果。
实验报告-紫外-可见分光光度法测铁的含量- 最低0.27元开通文库会员，查看完整内容>；原发布者：姬态尼Fe3+能与领二氮菲生成淡蓝色配合物（不稳定），故显色前加入还原剂：盐酸羟胺使其还原为Fe2+。三、仪器及试剂紫外可见分光光度计、铁标准溶液：含铁0.01mg/mL、0.1%邻菲罗啉水溶液、10%盐酸羟胺水溶液、1mol/lNaAc缓冲溶液（pH4.6）。四、实验步骤1．吸收曲线的绘制和测量波长的选择吸取0.0mL和6.0mL铁标准溶液分别注入两个50mL容量瓶中，依次加入5mlNaAc溶液，2.5ml盐酸羟胺溶液，5ml邻菲罗啉溶液，用蒸馏水稀释至刻度，摇匀。用1cm比色皿，以试剂空白为参比，在440~560nm之间，每隔0.5nm测吸光度。然后以波长为横坐标，吸光度A为纵坐标，绘制吸收曲线，找出最大吸收波长。2、标准曲线的绘制 分别吸取铁的标准溶液0.0、2.0、4.0、6.0、8.0、10.0ml于6只50ml容量瓶中，依次分别加入5ml醋酸－醋酸钠缓冲溶液，2.5ml盐酸羟胺溶液，5ml邻菲罗啉溶液，用蒸馏水稀释至刻度，摇匀，放置10分钟，在其最大吸收波长下，用1cm比色皿，以试剂溶液为空白，测定各溶液的吸光度，以铁含量(mg/50ml)为横坐标，溶液相应的吸光度为纵坐标，绘制标准曲线。五、实
