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液氮冻存细胞应注意哪些问题

2020-12-17新闻27

当我们的液氮罐内存放细胞的时候,需要在低温液氮的环境下才能维持细胞的活性,但是细胞长的太过培养液出现很黄的现象,细胞可能出现污染现象,这时候细胞已经开始凋亡或者崩解。遇到这类现象我们应该采用哪种方法解决呢?

冻存管

细胞常见问题:

1:存放的细胞浓度过低(1-5乘以1000000/ml)的时候,需要离心后调整细胞浓度。

2:冻存管的盖子一定要拧紧,防止复苏水浴的时候渗水现象,造成二次污染,选择管子或者盖子的时候尽量选择原装的。

3:冻存盒过于单薄,细胞被迅速降温,应选择厚的泡沫塑料盒,或者塞入大量干棉花,这样降低细胞温度变化幅度大。

4:液氮面应该高于细胞界面,这样才能维持活性。

5:为了防止错拿细胞,每支冻存管上都标上细胞名称及时间,做好记录。

液氮罐

细胞复苏:

1:取出冻存管后,直接放入37摄氏度的温水中,不时摇晃让其尽快融化。

2:取出的冻存管打开后使用吸管吸出细胞液,加到离心管滴加10倍以上的培养液混合均匀。

3:去除上清液,加入10%小牛血清培养液重悬细胞,调整细胞密度,在37摄氏度的培养箱中培养。

4:次日更换一次培养液,继续培养。

#血液疾病

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