此前，小番健康介绍了科学家在EV制备方向，得到了一项有趣的科学进展，那就是从血浆源性细胞外囊泡中高效重复地清除乙型肝炎病毒。EVs，指的是细胞外小泡或称为细胞外囊泡，德国科学家认为，EVs是病毒感染中新兴角色，其主要作用包含穿梭病毒成分和介导免疫反应以及可能的病毒传播(下图：德国慕尼黑工业大学)。
乙肝EV介导模型研究，相比普通EV制备，新方法促进无污染纯化
早期，EV制备是受到阻碍的。当然，在2020年12月22日Stephanie Jung、Karolin Fiona Kirsten Jacobs、Mikhail Shein、Anne KathrinSchütz等科学家，他们来自德国慕尼黑技术大学医学院病毒学研究所、德国慕尼黑工业大学化学系巴伐利亚核磁共振中心、德国哥廷根IBA GmbH，介绍了一些制备方法，通过结合SEC与特异性靶向病毒表面抗原的亲和分离，以促进无病毒或抗体污染的EV样本纯化。
研究人员介绍，为了确定SEC去除乙肝病毒的潜力，对现有方案进行了优化，并将其应用于含病毒血浆样品的纯化。早期，科学家使用的是，病毒-电动汽车分离法（Urbanelli等人，2019年），但这一研究进展受到了一些阻碍。德国研究人员介绍的新方法，在与以往研究比较时发现，直径约为42 nm的HBV颗粒显著减少（试验数据来自：Journal of Extracellular Vesicles）。
乙肝表面抗原浓度降低了，但很可能是由于SEC无法去除较大的丝状体，因而没有有效地降低。和早期的2级组分F1相比时，2级组分F2含有更小的颗粒，始终具有更多的HBV衍生杂质。研究人员在比较不同样品F2的粒度分布时观察到：颗粒去除效率<=50.75nm的显著差异。我们怀疑，不同qEV批次之间的质量差异，是导致这种影响的原因，我们的数据显示了预期结果的全部范围。
根据实验装置的不同，只使用F1可能更为合理，因为它不受质量差异影响。尽管如此，乙肝病毒的污染可能通过后续的亲和纯化完全消除，这突出了亲和纯化的稳健性。因此，本研究人员得出结论：SEC明显减少了EV样本中，较小病毒粒子的数量，但需要额外的纯化步骤。是否感到德国科研人员总结经验晦涩不易懂呢？小番健康作一个简答描述：
德国慕尼黑技术大学医学院病毒学研究所等研究人员介绍，他们开发了一种从EV样本里面，完全去除乙肝病毒的方法。这种方法目前有一个优势和一个缺陷，主要缺陷是，联合纯化步骤之后的产率偏低，主要优势是在这种EV样本中，观察到了完全没有的乙肝病毒颗粒、乙肝表面抗原、乙肝核心抗原、抗体污染以及感染。解决缺陷的主要方法是，考虑扩大规模来实现足够的EVs运用于实现今后慢性乙肝病毒感染的功能性治愈研究领域。
这种制备方法 早期有哪些实验数据？
在国际著名学术期刊《Journal of Extracellular Vesicles》上，德国研究人员也有提及这些问题。比如，以往科学家已经成功地使用了来自90μl 丁肝病毒感染患者的血清样本的二次纯化的EVs，每96孔格式的免疫刺激重复。因为额外的亲和纯化，使EV样品F1中的粒子数减少了约50倍，500μl血浆样品应提供足够的EV，来重复一次免疫刺激。
德国研究人员已经使用HDV单感染细胞释放的EVs进行免疫刺激，在原始人类免疫细胞中，引起促炎性细胞因子反应。使用两个175cm~2细胞培养瓶在2周内从感染细胞中获得的EVs，可以进行浓度梯度和重复的5种免疫刺激。总体看来，德国研究人员提出的方案，对EV介导的病毒感染效应进一步研究，可能可以在针对各种疾病的新疗法发展增添裨益（观点来自：2020年12月22日 Journal of Extracellular Vesicles 从血浆源性细胞外囊泡中高效、重复地清除乙型肝炎病毒）。
