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dna聚合酶酶活性 请问DNA聚合酶活性的测定方法是什么?

2021-04-27知识3

关于DNA外切酶具有核酸外切酶活性的相关概念 DNA聚合酶具有两种活性,一个是聚合酶活性,5’—3’,意思是说在合成的单链或者引物链的3’加上与模板链互补的脱氧核苷酸此外,DNA聚合酶还有一个外切酶活性位点,用来校正剪切掉错误的脱氧核苷酸.这个活性是3’—5’方向,所以可以将新链3’端的错误配对脱氧核苷酸去掉.两个位点对于DNA的结合能力是不同的,正常情况(即配对正确)下,聚合酶位点的结合能力强,而外切酶位点结合能力弱,因此DNA聚合酶从5’向3’合成双链DNA;当合成时出现错配的情况,聚合酶位点与错配链的结合能力下降约100倍,而外切酶的结合能力不变,强于此时的聚合酶位点,所以DNA3’端移向外切酶位点,并剪切掉错误的配对;当错误配对被切掉后,相当于重新回到了正确配对的情况,故而聚合酶位点结合能力再次强于外切酶位点,DNA回到聚合酶位点,继续合成新链.这是由我们分子生物学的课程中学来的,我们使用的教材是《molecular biology of genes》,由发现DNA双螺旋的Waston主编如果你还是不懂,可以将邮箱发给我,我可以将我们上课的课件发给你

DNA聚合酶的主要活性是什么? DNA聚合酶的主要活性是催化DNA的合成(在具备模板、引物、dNTP等的情况下)及其相辅的活性

DNA聚合酶与DNA连接酶有什么区别? 1、作用不同DNA聚合酶以亲代21135261DNA为模板4102,催化底物dNTP分子聚合形成子代DNA。DNA 连接酶分为两大类:一类是1653利用ATP 的能量催化两个核苷酸链之间形成磷酸二酯键的依赖ATP 的DNA 连接酶,另一类是利用烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD+)的能量催化两个核苷酸链之间形成磷酸二酯键的依赖NAD*的DNA 连接酶。2、连接片段不同DNA连接酶:主要是连接DNA片段之间的磷酸二酯键,起连接作用,在基因工程中起作用。DNA聚合酶:主要是连接DNA片段与单个脱氧核苷酸之间的磷酸二酯键,在DNA复制中起做用。3、模板不同DNA聚合酶是以一条DNA链为模板,将单个核苷酸通过磷酸二酯键形成一条与模板链互补的DNA链;而DNA连接酶是将DNA双链上的两个缺口同时连接起来。因此DNA连接酶不需要模板。参考资料来源:-DNA聚合酶参考资料来源:-DNA连接酶

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