荧光定量PCR问题您好,我最近在做qpcr,我做的是一个基因在不同组织中的表达,用相对定量的方法,我想请问一下用spss进行数据分析时是用2-delter delter值输入进去进行方差分析吗,实验重复了三次,我是取每次算一个值还是先将CT值平均最后再算2-delter delter值呢?还是我需要做3次实验,每次每个组织重复三次,取平均后得到2-delter delter值,用三次实验得出的值(
基因缺失一很小的部分有多大影响,怎么补救? http://www. ncbi.nlm.nih.gov/pubmed /17352388/ 症状:severe mental retardation,absence of speech,sleep disturbances,behavioral problems,and some dysmorphic 。
PCR的原理是什么 PCR(聚合酶链式反应)技术的基本原理类似于DNA的天然复制过程,其特异性依赖于与靶序列两端互补的寡核苷酸引物。PCR由变性→退火→延伸三个基本反应步骤构成:①模板DNA的变性:模板DNA经加热至93℃左右一定时间后,使模板DNA双链或经PCR扩增形成的双链DNA解离,使之成为单链,以便它与引物结合,为下轮反应作准备。②模板DNA与引物的退火(复性):模板DNA经加热变性成单链后,温度降至55℃左右,引物与模板DNA单链的互补序列配对结合。③引物的延伸:DNA模板-引物结合物在72℃、DNA聚合酶(如TaqDNA聚合酶)的作用下,以dNTP为反应原料,靶序列为模板,按碱基互补配对与半保留复制原理,合成一条新的与模板DNA链互补的半保留复制链。重复循环变性→退火→延伸三过程就可获得更多的“半保留复制链”,而且这种新链又可成为下次循环的模板。每完成一个循环需2~4分钟,2~3小时就能将待扩目的基因扩增放大几百万倍。扩展资料:PCR反应条件为温度、时间和循环次数。温度与时间的设置:基于PCR原理三步骤而设置变性-退火-延伸三个温度点。在标准反应中采用三温度点法,双链DNA在90~95℃变性,再迅速冷却至40~60℃,引物退火并结合到靶序列上,然后快速升温至70~。